潔凈室和潔凈區(qū)域必須定期清潔和消毒。通常先使用清潔劑，然后再使用消毒劑。可能有必要用水清除消毒劑的殘留物。設(shè)備也應(yīng)進(jìn)行清潔和消毒。此外，對(duì)于人員來(lái)說(shuō)，手套手的消毒也很重要。

本文回顧了在制藥廠內(nèi)實(shí)際應(yīng)用清潔和驗(yàn)證計(jì)劃時(shí)需要考慮的要點(diǎn)，重點(diǎn)是消毒劑的選擇。

清潔劑

潔凈室需要清潔劑來(lái)清除"污垢"（蛋白質(zhì)、油脂等）。清潔劑可滲透污垢，降低表面張力（將污垢固定在表面上），從而清除污垢。這是消毒劑有效發(fā)揮作用的必要條件。此外，懸浮液中的微生物很容易通過(guò)沖洗去除或用消毒劑殺死。

為此，必須選擇一種有效的洗滌劑。在這里，重要的是所選的洗滌劑必須能夠

適用于不同類(lèi)型的水（如"硬"水和"軟"水）

與消毒劑兼容

不損壞表面

不產(chǎn)生泡沫

對(duì)不同的污垢（如油脂、污垢、油、蛋白質(zhì)、鐵銹、皮膚）有效

一般來(lái)說(shuō)，中性清潔劑是理想的選擇。根據(jù)使用區(qū)域（如無(wú)菌灌裝區(qū)）的不同，清潔劑可能需要無(wú)菌。

消毒

消毒是指使微生物失活或消滅微生物。有些消毒劑具有抑菌作用，有些則具有殺菌作用。重要的是，消毒與滅菌不同。消毒是按標(biāo)準(zhǔn)減少微生物。消毒劑（或"消毒劑"）有多種類(lèi)型，代表了不同的化學(xué)制劑。

消毒劑的類(lèi)型

消毒劑是各類(lèi)化學(xué)制劑中的一種，可減少存在的微生物數(shù)量（通常是無(wú)生命物體上的微生物）。消毒劑能殺死無(wú)性微生物，但不一定能殺死細(xì)菌孢子。有效的消毒劑必須符合歐洲標(biāo)準(zhǔn)（CEN系列）或美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)（AOAC標(biāo)準(zhǔn)）。

這些標(biāo)準(zhǔn)包括用大量不同微生物對(duì)消毒劑進(jìn)行挑戰(zhàn)，并記錄隨著時(shí)間推移對(duì)數(shù)的減少。這些研究是針對(duì)消毒劑溶液（"懸浮試驗(yàn)"）、表面和"現(xiàn)場(chǎng)"（以制定適當(dāng)?shù)那鍧嶎l率）進(jìn)行的。

消毒劑的活性范圍、作用模式和功效各不相同。有些消毒劑具有抑菌作用，能阻止細(xì)菌種群的生長(zhǎng)。在這種情況下，消毒劑可通過(guò)與核酸相互作用、抑制酶或滲入細(xì)胞壁，對(duì)細(xì)胞造成選擇性和可逆的變化。一旦消毒劑脫離與細(xì)菌細(xì)胞的接觸，存活的細(xì)菌種群就有可能生長(zhǎng)。其他消毒劑具有殺菌作用，它們通過(guò)不同的機(jī)制破壞細(xì)菌細(xì)胞，包括造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷、自溶、細(xì)胞裂解和細(xì)胞質(zhì)滲漏或凝固。

制藥業(yè)使用的消毒劑種類(lèi)繁多，其活性范圍和作用模式也各不相同。作用機(jī)理并不總是完全清楚，仍在繼續(xù)研究。在選擇過(guò)程中需要考慮一系列不同的因素，包括作用模式、功效、兼容性、成本以及當(dāng)前的健康和安全標(biāo)準(zhǔn)。

由于化學(xué)成分的多樣性，表面消毒劑對(duì)微生物細(xì)胞的作用模式各不相同。不同的消毒劑針對(duì)微生物細(xì)胞內(nèi)的不同部位。這些部位包括細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)膜（磷脂基質(zhì)和酶提供了各種目標(biāo)）和細(xì)胞質(zhì)。有些消毒劑通過(guò)破壞細(xì)胞膜或擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞后，會(huì)對(duì)細(xì)胞內(nèi)成分產(chǎn)生作用。對(duì)消毒劑的分類(lèi)和細(xì)分有不同的方法，包括按化學(xué)性質(zhì)、活性方式或?qū)ξ⑸锏囊志蜌⒕饔梅诸?lèi)。

消毒劑種類(lèi)繁多，篇幅有限，無(wú)法一一列舉。本指南介紹一些較常用的消毒劑類(lèi)型。表面消毒劑可分為：

非氧化消毒劑

酒精

酒精對(duì)無(wú)性繁殖細(xì)菌和真菌的殺滅效果隨其分子量的增加而增加（因此乙醇比甲醇更有效，而異丙醇又比乙醇更有效）。酒精對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜的作用是使其具有滲透性，如果有水存在，酒精的效力就會(huì)增加，從而導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)滲漏、蛋白質(zhì)變性和最終細(xì)胞裂解。使用酒精的優(yōu)點(diǎn)包括成本相對(duì)較低、氣味小和揮發(fā)快。

醛類(lèi)

醛包括甲醛和戊二醛。醛類(lèi)在變性細(xì)菌細(xì)胞蛋白質(zhì)方面具有非特異性作用，可導(dǎo)致細(xì)胞蛋白質(zhì)凝固。某些醛類(lèi)物質(zhì)的使用存在一些安全隱患。

兩性劑

兩性殺菌劑同時(shí)具有陰離子和陽(yáng)離子特性，活性范圍相對(duì)較廣，但由于無(wú)法破壞內(nèi)生孢子而受到限制。兩性消毒劑常用作表面消毒劑。例如烷基二（氨基乙基）甘氨酸類(lèi)化合物。

酚類(lèi)

合成酚類(lèi)物質(zhì)廣泛存在，如雙酚（三氯生）和鹵代酚（氯代苯酚）。酚類(lèi)具有殺菌和抗真菌作用，但對(duì)孢子無(wú)效。有些酚類(lèi)物質(zhì)會(huì)通過(guò)破壞質(zhì)子動(dòng)力而導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞受損，而有些酚類(lèi)物質(zhì)則會(huì)攻擊細(xì)胞壁，導(dǎo)致細(xì)胞成分泄漏和蛋白質(zhì)變性。

季銨化合物（QACs）

季銨化合物是有機(jī)取代銨化合物的陽(yáng)離子鹽，對(duì)微生物具有相當(dāng)廣泛的活性。它們對(duì)細(xì)菌孢子無(wú)效。QAC可能是制藥業(yè)使用最廣泛的非氧化性消毒劑，例如西曲銨和苯扎氯銨。它們對(duì)細(xì)胞膜的作用方式是通過(guò)與磷脂的相互作用導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)滲漏和細(xì)胞質(zhì)凝固。

氧化消毒劑

這類(lèi)消毒劑包括過(guò)氧乙酸和過(guò)氧化氫等釋放氧的化合物（過(guò)氧基因）。它們通過(guò)氧化作用破壞細(xì)胞壁，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)滲漏和細(xì)菌細(xì)胞酶變性。氧化劑的優(yōu)點(diǎn)是透明無(wú)色，從而避免了表面染色。

消毒劑效果好壞的原因是什么？

影響所選消毒劑效果好壞的因素有很多。下面簡(jiǎn)要介紹這些因素：

微生物數(shù)量：一般來(lái)說(shuō)，消毒劑對(duì)低數(shù)量的微生物比對(duì)高數(shù)量的微生物更有效。

微生物的種類(lèi)：有些微生物比其他微生物更具抵抗力。在這里，革蘭氏陽(yáng)性菌通常比革蘭氏陰性菌更容易殺死；無(wú)性繁殖的細(xì)菌比真菌更容易殺死；而形成內(nèi)孢子的細(xì)菌最難殺死（對(duì)這些細(xì)菌需要使用殺孢子劑類(lèi)的消毒劑）。

微生物的位置：這里的關(guān)鍵問(wèn)題是微生物固定在表面上的可能性有多大？表面附著的程度會(huì)影響微生物的清除和殺滅。

接觸時(shí)間：這是消毒劑殺死微生物所需的時(shí)間，也是消毒劑必須與表面接觸的時(shí)間。一般為1至5分鐘，但這一時(shí)間只能通過(guò)消毒劑功效測(cè)試來(lái)評(píng)估。

消毒濃度：消毒劑在生產(chǎn)或驗(yàn)證過(guò)程中，在設(shè)定的濃度范圍（化學(xué)品與水的比例）內(nèi)最有效。稀釋過(guò)度或稀釋不足都會(huì)導(dǎo)致藥效降低。

溫度：使用消毒劑的溫度會(huì)影響反應(yīng)速度。一般來(lái)說(shuō)，較低的溫度，尤其是低于消毒劑評(píng)估閾值的溫度，意味著消毒劑可能不起作用。這意味著，如果在冷藏區(qū)使用消毒劑，應(yīng)評(píng)估其是否仍然有效。pH值：與溫度一樣，極端的pH值也會(huì)影響消毒劑的效果。

泥土：如上所述，如果泥土沒(méi)有被有效清除，就會(huì)干擾消毒劑或阻止消毒劑與微生物細(xì)胞壁接觸。

水的類(lèi)型：硬水可能是一個(gè)問(wèn)題。生產(chǎn)設(shè)施中用于配制消毒劑的水應(yīng)納入消毒劑功效研究。

SPORIS?舒博牌消毒劑產(chǎn)品是一系列采用舒博無(wú)菌控制解決方案的無(wú)菌高效殺孢子劑和消毒劑，涵蓋了醇類(lèi)、過(guò)氧化氫、復(fù)方過(guò)氧化物和復(fù)方季銨鹽等多種類(lèi)型。適用于多個(gè)領(lǐng)域的潔凈環(huán)境，包括制藥、生物、醫(yī)療器械工業(yè)等。這些消毒劑具有安全、高效、無(wú)殘留或者低殘留的特性，能夠廣譜滅殺細(xì)菌孢子、真菌孢子、細(xì)菌、放線菌、分支桿菌、酵母菌、霉菌和病毒，而不對(duì)產(chǎn)品本身造成傷害?？呻S貨一并發(fā)送分析證書(shū)、輻射證書(shū)、LAL測(cè)試報(bào)告和無(wú)菌測(cè)試報(bào)告。

如何選擇合適的消毒劑？

考慮到上述"影響因素"，以下是選擇消毒劑時(shí)應(yīng)考慮的一些關(guān)鍵標(biāo)準(zhǔn)。在進(jìn)行選擇時(shí)，將這些標(biāo)準(zhǔn)作為檢查清單是一種好的做法。這些標(biāo)準(zhǔn)是

廣譜活性：這是指消毒劑殺死不同類(lèi)型微生物的能力。

快速作用：理想的接觸時(shí)間為

可與第二種消毒劑輪換使用。

可在較寬的pH值和溫度范圍內(nèi)工作

洗滌劑兼容性。

與不同類(lèi)型的表面兼容：消毒劑不能損壞材料，否則會(huì)產(chǎn)生腐蝕和褪色問(wèn)題。對(duì)于侵蝕性較強(qiáng)的消毒劑，建議用水或酒精擦拭

應(yīng)評(píng)估消毒劑是否會(huì)在表面留下殘留物。這可能導(dǎo)致表面損壞或消毒劑/洗滌劑的可計(jì)算性問(wèn)題。為避免這種情況，可能需要進(jìn)行表面沖洗（如使用注射用水或酒精）。

無(wú)菌：如果要在無(wú)菌灌裝區(qū)使用消毒劑，則必須能夠在不失去消毒效果的情況下進(jìn)行滅菌。滅菌方法包括伽馬射線照射和過(guò)濾。

形式：應(yīng)考慮消毒劑的表現(xiàn)形式。是否需要即用型濃縮液、觸發(fā)式噴霧劑或飽和擦拭劑？

其他考慮因素包括操作員的健康和安全以及對(duì)環(huán)境的影響。

消毒制度

清潔和消毒有許多重要步驟。這些步驟是

清潔

就藥品生產(chǎn)而言，清潔是指清除表面殘留物和污垢，使其達(dá)到視覺(jué)上清潔的程度。這涉及明確的使用方法，通常需要使用清潔劑。清潔劑的作用通常是滲透污垢，降低表面張力（將污垢固定在表面上），使其得以清除。

對(duì)于潔凈室來(lái)說(shuō)，在使用消毒劑之前，必須采取此類(lèi)清潔步驟。在使用消毒劑之前，必須對(duì)表面或設(shè)備進(jìn)行適當(dāng)?shù)那鍧?，以便消毒劑有效發(fā)揮作用。

消毒

消毒劑適用于已清潔的表面。在使用消毒劑時(shí)，如前所述，關(guān)鍵在于接觸時(shí)間。消毒劑只有在與表面接觸的有效時(shí)間內(nèi)才有效。以重疊的方式涂抹消毒劑更容易達(dá)到這一目的。需要輪換使用消毒劑時(shí)，在更換消毒劑之間要用水沖洗（通常使用WFI）。這樣做是為了去除可能會(huì)降低新消毒劑功效的消毒劑和洗滌劑殘留物（如陰離子）。

清潔和消毒技術(shù)

在清潔房間時(shí)，所用設(shè)備（拖把和水桶）的設(shè)計(jì)應(yīng)與潔凈室的等級(jí)相適應(yīng)。在進(jìn)行清潔時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵守清潔制度。使用抹布和拖把頭進(jìn)行清潔和消毒時(shí)，最好讓清潔物品達(dá)到飽和狀態(tài)，并以一系列平行、重疊的方式（重疊部分約為四分之一）擦拭區(qū)域，切勿打圈。清潔方向應(yīng)朝向操作者（從上到下，從后向前）。只能使用一次消毒劑或清潔劑，以避免濃度過(guò)高。清潔和消毒應(yīng)從視覺(jué)上"最干凈"的區(qū)域開(kāi)始，最后才是"最臟"的區(qū)域。通常在使用前對(duì)每個(gè)加工區(qū)域進(jìn)行清潔。一般來(lái)說(shuō)，應(yīng)通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定清潔頻率。

輪換使用消毒劑

從抗藥性菌株的積累角度來(lái)看，輪換使用消毒劑的科學(xué)依據(jù)是值得懷疑的，因?yàn)槟壳斑€沒(méi)有關(guān)于微生物獲得抗藥性的可靠證據(jù)。從不同殺菌劑的活性范圍來(lái)看，輪用消毒劑的理由更為可信。如上所述，不同的消毒劑有不同的作用模式，有些消毒劑對(duì)不同的微生物比其他消毒劑更有效，因此，使用兩種消毒劑以確保對(duì)微生物有更大范圍的效力是更合乎邏輯的。不管這種說(shuō)法有什么道理，輪換使用兩種消毒劑是一個(gè)常見(jiàn)的監(jiān)管問(wèn)題，在歐洲，歐盟GMP附件1中對(duì)此有明確規(guī)定。該指南指出，"在使用消毒劑時(shí)，應(yīng)使用一種以上的消毒劑"。

因此，在選擇消毒劑時(shí)，許多制藥廠都會(huì)選擇兩種"使用中"的消毒劑，有時(shí)還會(huì)選擇第三種消毒劑作為備用，以防出現(xiàn)重大污染事故，如生物負(fù)載污染積累，出現(xiàn)抗藥性或難以用常規(guī)消毒劑消除。后備消毒劑通常具有更強(qiáng)的殺菌和殺孢子作用，如氧化劑，由于可能對(duì)設(shè)備和場(chǎng)所造成損害，因此限制常規(guī)使用。兩種主要消毒劑通常輪流使用。

清潔和消毒程序

清潔和消毒必須在標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）中詳細(xì)說(shuō)明，以確保做法的一致性。此外，標(biāo)準(zhǔn)操作程序必須足夠詳細(xì)，因?yàn)槿绻徽_使用清潔劑和消毒劑，它們只能發(fā)揮部分作用。標(biāo)準(zhǔn)操作程序應(yīng)說(shuō)明

使用的清潔劑和消毒劑的類(lèi)型（兼容）。

消毒劑的輪換頻率。

合適的清潔材料清單。

清潔技術(shù)。

接觸時(shí)間。

沖洗。

清潔和消毒的頻率。

清潔劑和消毒劑進(jìn)出清潔區(qū)的程序（包括消毒劑的消毒程序）。

清潔劑和消毒劑的保存時(shí)間

包括這些基本的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)⒋_保清潔和消毒程序能夠始終如一地實(shí)施。

設(shè)備消毒

對(duì)設(shè)備進(jìn)行有效的清潔和消毒非常重要，因?yàn)樵O(shè)備可能無(wú)法進(jìn)行目視檢查，而且容易形成生物膜。

清潔工業(yè)設(shè)備的主要方法是使清潔機(jī)制與設(shè)備本身融為一體。這可以通過(guò)使用壓力、熱量、蒸汽消毒、機(jī)械清除或化學(xué)品來(lái)實(shí)現(xiàn)，被稱(chēng)為原位清潔（CIP）或原位消毒（SIP）。在進(jìn)行化學(xué)或熱處理之前，必須嘗試使用蒸汽或高壓水清洗去除工藝殘留物和顆粒。堿基消毒劑和清潔劑通常用于CIP系統(tǒng)，其中氫氧化鈉的使用最為廣泛。此類(lèi)苛性堿可輕易去除有機(jī)沉積物，而不會(huì)對(duì)設(shè)備造成影響。設(shè)備清洗必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。

手套消毒

對(duì)于從事關(guān)鍵活動(dòng)的工作人員，應(yīng)經(jīng)常使用有效的手部消毒劑對(duì)戴手套的手進(jìn)行消毒。經(jīng)過(guò)消毒的手套手可以幫助需要進(jìn)行無(wú)菌操作的工作人員，盡管消毒劑本身并不能取代不良的無(wú)菌技術(shù)。

市面上有許多手部消毒劑，最常用的是含酒精的凝膠。為確保所選的手部消毒劑有效，歐洲制定了一項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)（EN 1499和EN 150025A），描述了對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證的方法。該測(cè)試確定洗手液是否能在模擬實(shí)際條件下減少瞬時(shí)微生物菌群的數(shù)量。該標(biāo)準(zhǔn)概述了衛(wèi)生洗手液的評(píng)估方法。大多數(shù)洗手液都以乙醇或異丙醇為基礎(chǔ)。

有三個(gè)關(guān)鍵變量會(huì)影響手部消毒劑的使用。它們是將洗手液攪拌和擦入手套的動(dòng)作、使用頻率和使用量。